Хирургическое лечение генерализованного пародонтита

«ДентАрт» №3, 2009 год

Наталья Ярынич-Бучинская,
клиника «Медина»
(г. Кировоград, Украина)
Игорь Кайдашев,
Петр Скрипников,
Лидия Богашова,
Нина Боброва,
Нина Куценко,
Украинская медицинская стоматологическая академия
(г. Полтава, Украина)

Одна из наиболее сложных задач пародонтологии — это восстановление убыли костной ткани, цемента зуба, зубной связки. В настоящее время одним из перспективных путей внедрения в медицинскую практику достижений молекулярной и клеточной биологии является трансплантация стволовых клеток с целью замещения в организме поврежденных и изношенных тканей.

Воспалительные заболевания тканей пародонта, в частности генерализованные формы пародонтита, принадлежат к самым распространенным стоматологическим патологиям. По данным ВОЗ (1980), распространенность в мире воспалительных заболеваний пародонта в целом достигает 80%;10 отмечена тенденция к увеличению распространенности этих заболеваний на Украине — 60-99%.3 Кроме того, системные или фоновые заболевания организма могут сопровождаться пародонтитом. В этом случае диагностированный пародонтит является пародонтальным синдромом. Большое внимание исследователи уделяют реактивности организма больных пародонтитом.1, 6

Патологический процесс в опорноудерживающем аппарате зуба на органном уровне при пародонтите характеризуется наличием стойких прогрессирующих морфологических изменений в связочном аппарате, а на уровне организма в целом — наличием хронических очагов одонтогенной инфекции.4 Следовательно, многочисленные причины и разнообразие взглядов на патогенез заболевания обусловливают значительные трудности в выборе лечения хронического генерализованного пародонтита.

В связи с внедрением новых молекулярно-биологических технологий, в частности полимеразной цепной реакции, в последнее время в научной литературе серьезно пересмотрена этиология воспалительных заболеваний пародонта.12 Среди этиологических «пародонтопатогенных» микроорганизмов наиболее часто сообщается о 5 анаэробных видах: Porphyromonas gingivalis, Bacteroides forsythus (seu Tannerella forsythensis), Prevotella intermedia, Treponema denticola, Actinobacillus actinomycetemcomitans. 5, 17, 18

Общепризнанным положением является то, что деструкция пародонта при воспалительных заболеваниях — результат комбинированного действия микроорганизмов и защитных процессов самих тканей и, как правило, преобладания последних в деструкции. Несмотря на многочисленные особенности этиологии и компоненты патогенеза, ведущий клинический признак воспалительных заболеваний пародонта — деструкция костной ткани пародонта, гибель зубной связки, восстановление которых и является главной целью лечения.

Реконструктивная пародонтальная терапия в комплексной терапии пародонтита занимает особое место. Ее перспективу составляет тканевая инженерия, предоставляющая живой заместительный материал в виде «выращенных» in vitro конструкций на основе биоматрикса из уникального источника — мезенхимальных стволовых клеток. Недавние исследования доказали, что мезенхимальные стволовые клетки взрослого человека способны трансформироваться в остеобласты, фибробласты, адипоциты, а также в другие клетки практически всех эктодермальных линий: гепатоциты, скелетные миоциты, кардиомиоциты, нервные, эндотелиальные, эпителиальные и даже эндокринные клетки.7, 8. 13 Накоплен значительный позитивный опыт применения терапии мезенхимальными стволовыми клетками для замещения костной ткани,20 и в частности тканей челюстно$лицевой области.11, 13, 14 Наращивание клеток обосновано малым их количеством при выделении от пациента, а биоматрикс и ряд культуральных условий12 обеспечивают микроокружение для дифференцирования мезенхимальных стволовых клеток именно в остеобласты.16, 19 Мезенхимальные стволовые клетки в поврежденной ткани усиливают свою способность приживаться15 и репопулируют утраченные клетки, восстанавливая дефект.

Трансплантация аутоклеток как новое направление

В настоящей работе представлен хирургический метод лечения хронического генерализованного пародонтита, разработанный в Центральной научно- исследовательской лаборатории Украинской медицинской стоматологической академии под руководством проф. И.П. Кайдашева,21, 25, 26 который является новым и впервые предложенным способом восстановительного лечения необратимо поврежденных тканей пародонта путем трансплантации аутоклеток — клеточной инженерии. Метод применен группой авторов у 35 пациентов с генерализованным пародонтитом ІІ-ІІІ стадии заболевания.22, 23, 24 Выбор клеточного материала и биоматрицы (носителя, проводника) — определяющий фактор применения современных технологий. При этом методе лечения носителем стволовых аутологичных клеток крови нами предложен коллапан.

Диагноз хронического генерализованного пародонтита устанавливался на основании общепринятых клинических критериев и данных параклинических методов обследования. Для оценки состояния костной ткани альвеолярного отростка челюстей пациентам проводили рентгенологическое исследование — прицельную рентгенограмму, радиовизиограмму, пантомограмму на аппарате «Трофи». Данные визиограмм, рентгенограмм и ортопантомограмм до оперативного вмешательства свидетельствовали о том, что у большинства пациентов определялась деструкция альвеолярного отростка, межзубных перегородок с обнажением корней зубов на 1/3-1/2. Резорбированный край гребней нечеткий и неровный. Периодонтальная щель зубов неравномерно расширена, в том числе и за счет вертикально расположенных участков деструкции в зонах, прилежащих к периодонтальной щели. В этих местах нечетко прослеживалась компактная пластинка лунок — за счет как деструкции, так и остеопороза гребня. В связи с остеопорозом в неразрушенной части гребней структура губчатого вещества прослеживалась нечетко, исчезали горизонтально расположенные толстые балки, структура губчатого вещества начинала приобретать ячеистый характер. Уменьшена высота коронок в связи с исчезновением на режущей поверхности слоя эмали и дентина. Ширина просвета корневых каналов неравномерна за счет их сужения и даже облитерации в нижних отделах (фото 9 а, 10 а, 11 а).

Всем пациентам назначали клиническое исследование крови и мочи, кровь на сахар, при необходимости консультировали больных у других специалистов. В первый день обращения пациента исследовали содержимое пародонтальных карманов и далее проводили качественное определение ДНК микроорганизмов в биологических образцах методом полимеразной цепной реакции. В зависимости от результатов выявления возбудителей, их чувствительности к антибиотикам пациентам назначалась антимикробная терапия в послеоперационном периоде. Чаще микроорганизмы были чувствительными к цефалоспоринам.

Подготовка к операции

При подготовке больного к операции проводили гигиену полости рта: орошение 0,02% раствором хлоргексидина биглюконата, снятие над$ и поддесенных зубных отложений по Грейси (ручным способом), повторное удаление отложений осуществляли ультразвуковым аппаратом Кавитрон, периодически повторяли орошение раствором хлоргексидина, затем обрабатывали десну мазью Метрагил-Дента, мазью солкосерила под твердую повязку Вакопак на сутки. На второй день после снятия повязки и обработки 0,02% раствором хлоргексидина осуществляли контроль снятия зубных отложений, оставшийся камень доснимался аппаратом Кавитрон или в труднодоступных местах пескоструйным аппаратом фирмы NSK, производилась ирригация пародонтальных карманов ирригатором Ровента, растворами парагель или водным раствором хлорфиллипта, фитодента, гевалекса или корсодила. После ирригации выполняли массаж десны, затем накладывали мазевые аппликации из траумеля, парагеля под парафин на 20 мин. На следующий день назначали гидромассаж, мазевые аппликации и парафиновые повязки.

До операции таких процедур проводили 5-7 (фото 3). За 3 дня до операции проводилась проба на гентамицин (т.к. ростовая среда для лейкоцитов содержит гентамицин), линкомицин, цифран. Устраняли травматическую окклюзию после определения травматических узлов путем применения артикуляционной бумаги. По показаниям осуществляли пластику уздечек верхней или нижней губ при соответственно низком или высоком ее прикреплении путем рассечения по центру и ушивания раны или путем полного иссечения уздечки. При выявлении мелкого преддверия выполняли операцию вестибулопластики по методу Кларка.27 Суть операции в том, что разрез проводился по границе подвижной и неподвижной слизистой, отслаивалась подвижная слизистая до внутренней поверхности нижней губы, углублялось преддверие разрезом параллельно альвеолярному отростку до ментальной складки; периост рассекался горизонтальным разрезом в глубине раны, отслоенная слизистая пришивалась в глубине раны к периосту, сухожилиям подбородочной и квадратным мышцам нижней губы (модификация операции Богашовой Л.Я., 2001). Рана в области альвеолярного отростка прикрывалась йодоформной марлевой полоской на 5-7 дней (рис. 1).

Все эти подготовительные оперативные вмешательства проводились за 2-3 недели до начала лечения. Подготовку биоинженерных трансплантатов на основе клеточных культур аутологичных лейкоцитов на коллапане осуществляли следующим образом. В связи со сложностью получения костного мозга, где содержится большее количество стволовых клеток, у больных генерализованным пародонтитом, альтернативным источником клеток, способных к регенерации и доступных, могут быть клетки периферической крови пациента. Забор клеточного материала производили у пациента путем взятия крови из кубитальной вены шприцем системы Вакутайнер с гепарином в объеме 4-5 мл (фото 1).

Культивирование лейкоцитов осуществляли при комнатной температуре в результате отстивания эритроцитов, полученную плазму отбирали в стерильную пробирку и центрифугировали при 1500 об/мин для получения осадка лейкоцитов. Осадок лейкоцитов однократно отмывали стерильным 0,9% раствором хлорида натрия и доводили концентрацию клеток питательной ростовой средой до конечной концентрации 106 клеток/мл. Ростовая среда содержит среду Игла (SIGMA, США), гентамицина сульфат (фармацевтическая фирма «Дарница», Украина) 100 мкг/мл, L$глутамин 2 мл (SIGMA, США), 5% аутологичную сыворотку. В ростовую среду с лейкоцитами пациентов вносили коллапан (ООО фирма «Интермедапатит», Москва) по 15$18 (1 г) гранул на 5 мл. Культивирование лейкоцитов проводили в термостате при 37°С с 5% СО2 9 дней (периодически встряхивая для ресуспензирования лейкоцитов). На 4-й день культивирования лейкоцитов на гранулах коллапана ростовая среда проверялась на предмет возможного бактериального загрязнения на тиогликолевой среде, среде Сабуро и на питательном агаре.

На 10 день гранулы коллапана с прикрепленными лейкоцитами отмывали от питательной ростовой среды. Для этого удаляли среду, наливали 2$3 мл 0,9% раствора хлорида натрия и центрифугировали при 1500 об/мин. Процедуру повторяли до тех пор, пока гранулы коллапана приобретали белый цвет. Отмытые гранулы применяли для трансплантации (фото 2).

Учитывая, что из костного мозга человека стволовые клетки — мезенхимальные, гемопоэтические, нейральные и др. — выходят в кровяное русло в малом количестве, на базе научной лаборатории Украинской медицинской стоматологической академии с целью подтверждения наличия и способности к клонированию стволовых клеток произведено иммунофенотипирование биоинженерных конструкций. В результате исследования было установлено, что стволовые клетки после их культивирования активизируются и способны участвовать в репаративной регенерации костной ткани. Для идентификации гемопоэтических стволовых клеток крови нами были использованы моноклональные антитела (МкАТ) (мышиные Ig) к поверхностным антигенам — кластерам дифференцирования (CD) CD 34 (Калтаг, США). Для изотипического контроля использовали мышиные Ig, меченные FITC, RPE и PETR (Калтаг, США). Метод основан на использовании иммунологической реакции антиген — антитело и высокой специфичности антител по отношению к клеточным антигенам. Подсчет клеток проводили на протяжении 300 секунд, при этом количество проанализированных клеток в пробе составляло от 15 до 20 тысяч.

Для идентификации мезенхимальных стволовых клеток в суспензии клеток из дезинтегрированных гранул коллапана мы использовали метод проточной цитометрии. На сегодняшний день не установлено единого универсального маркера для мезенхимальных стволовых клеток. Нами для идентификации мезенхимальных стволовых клеток использованы следующие панели моноклональных антител:

CD56/CD54/CD34 FITC/TriColor/RPE
CD56/CD54/CD45 FITC/TriColor/RPE
CD105/CD54/CD34 FITC/TriColor/RPE

Согласно литературным данным, эти клетки должны быть позитивными по отношению к CD56, CD54 (межклеточная адгезионная молекула 1), CD105 (эндоглобин) и негативными к CD34 (маркер гематопоэтических клеток) и CD45 (общий лейкоцитарный антиген). Результаты фенотипирования свидетельствуют, что в суспензии клеток, полученных из дезинтегрированных гранул коллапана, происходит удовлетворительный рост и накопление клеток двух видов: гемопоэтических клеток, экспрессирующих маркер CD34+, и мезенхимальных стволовых клеток с иммунофенотипом CD56lowCD54lowCD105+CD34-CD45-.

Методика операции

Трансплантация биоинженерного препарата, подготовленного в течение 9 дней для данного пациента, осуществлялась во время хирургического вмешательства предложенным нами методом открытого кюретажа (патент № 55698А от 15.04.2003 г.). Метод операции заключался в том, что проводился разрез в области оперируемых зубов верхней или нижней челюстей с вестибулярной и язычной поверхностей, по гребню десенных сосочков и далее разрез десны с вестибулярной стороны под углом 90° к десенным сосочкам до подвижной слизистой оболочки, с язычной поверхности такой разрез проводился с противоположного его края, таким образом, вертикальные разрезы не совпадали, что не нарушало питание костной ткани, особенно на нижней челюсти (рис. 2).

Отслаивали слизисто-накостничный лоскут, удаляли поддесенный камень, грануляции, сглаживали острые края и освежали костную ткань; обрабатывали оголенный корень бором, проводили аппликацию корня 18% раствором лимонной кислоты или ЭДТА 1-2 мин (фото 4). Затем в рану вводили произвольно измельченные гранулы коллапана (фото 5), лоскуты укладывали на место и ушивали капроновыми швами (фото 6). На десну на сутки накладывали гель солкосерила и повязку Вакопак (фото 7).

Пациенту рекомендовали гигиену полости рта, полоскания водным раствором хлорфиллипта, цифран с метранидазолом по 250 тыс. 3 раза в день в течение 5 дней. Повязку снимали на 2-й день, назначенные процедуры пациент продолжал выполнять в течение недели. На осмотр пациента назначали на 5, 7 день. В первые 3 месяца проводили гидромассаж десен каждый месяц, затем по 1 процедуре в 3 месяца. Состояние тканей пародонта оценивали на основании жалоб, данных анамнеза, клинического осмотра, определения объективных пародонтальных индексов и проб: гигиенического индекса по Федорову-Володкиной, индекса Грина-Вермиллиона, папиллярномаргинальноальвеолярного индекса (ПМА), зондовой пробы на кровоточивость, глубину пародонтального кармана, подвижность зубов, данных рентгенологического исследования и денситометрии.

При первичном осмотре жалоб на наличие самопроизвольной боли пациенты не предъявляли, отмечали небольшую ноющую боль при откусывании пищи. После снятия повязки определялся небольшой отек десны в области оперированного участка, десна слабо гиперемирована, пальпация малоболезненная, при прикосновении к десенному краю у 6 (30%) больных отмечена небольшая кровоточивость, подвижность зубов I степени, швы сохранены. Проводилась обработка раневой поверхности парагелем, йоддицерином, накладывалась мазь солкосерила. После снятия швов (на 7-10 день) отмечалась небольшая отечность десенного края, слабая болезненность при пальпации, цвет десны не изменен, кровоточивость отсутствовала.

Результаты хирургического лечения

Через месяц после операции состояние пациентов удовлетворительное, жалоб нет. При осмотре: десна бледно-розового цвета, уплотнена, не кровоточит при прикосновении, имеется небольшой патологический десенный карман до 2 мм. Подвижности зубов нет. Через 3-6 месяцев: жалоб нет, отека десенного края нет, десна уплотнена, не кровоточит, подвижности зубов нет, патологический карман не определяется, отмечено оголение шейки зубов (фото 8).

После проведенного хирургического вмешательства на визиограмме через месяц определялась стабилизация процесса в гребнях между зубами, у некоторых пациентов определялось уменьшение остеопороза, восстановление компактной пластинки по медиальной поверхности, увеличение высоты гребня, в результате чего вершина гребня располагалась на 2 мм ниже шейки. Уменьшилась ширина периодонтальных щелей, костные пародонтальные карманы уменьшились на 2/3 у пациентов с деструкцией до 1/2 величины корня и полностью исчезли у пациентов с деструкцией на 1/3 его длины.

Через 3-4 месяца определялось восстановление межальвеолярных перегородок, компактной пластинки. Уменьшилась ширина периодонтальной щели, значительно уменьшились пародонтальные карманы. Через 6-10 месяцев почти полностью восстановился межальвеолярный гребень между зубами, компактная пластинка отсутствовала только на верхушке гребня у пациентов с деструкцией межальвеолярной кости до 1/2, там же сохранялся остеопороз. Вершина гребня ниже шейки на 3 мм. Ширина периодонтальной щели приблизилась к нормальной, полностью исчезли пародонтальные карманы (фото 9, 10). Для более достоверного изучения результатов разработанного метода мы определяли плотность костной ткани в зоне оперативного вмешательства методом денситометрии. Плотность костной ткани определяли на радиовизиографе Трофи у 8 (22,9%) пациентов в отдаленные сроки, через год после оперативного вмешательства, изображение получали в виде гистограммы. Для получения гистограмм применяли датчики RWG, состоящие из маленьких пикселей, которые преобразовывают рентгеновские лучи в электрические сигналы. Плотность костной ткани определялась количеством рентгеновских лучей, поглощенных этой точкой.

Гистограммы плотности оцифровывали с помощью программы Граф2Диджит (Graph2Digit) с получением 50 интервалов. На гистограммах отображались изменения оптической плотности изображения. Поскольку оптическая плотность изображения в каждой точке прямо пропорциональна плотности костной ткани, то площадь под кривой гистограммы (рассчитывали в условных единицах) пропорциональна массе костной ткани на исследуемом участке. Полученные данные сравнивали, используя метод Стьюдента для связанных данных. Результаты денситометрии полученных гистограмм показали в среднем увеличение плотности костной ткани гребней альвеолярных отростков на 11,63 ±1,63 (р<0,001) при сравнении плотности кости в уровнях серого до и после начала лечения (рис. 3, 4). Отрезки А-В и А1-В1 на гистограммах — это костная ткань на участке от вершины альвеолярного гребня до его основания; вертикальная ось — значение плотности кости в оттенках серого. Индивидуальный прирост колебался от 7,23% до 19,64%. Таким образом, разработанный метод хирургического лечения генерализованного пародонтита ІІІІІ степени аутологичными мезенхимальными стволовыми клетками крови является наиболее эффективным в плане восстановления регенеративных и репаративных процессов, протекающих в кости челюсти.

Из 35 пациентов основной группы отдаленные результаты прослежены на протяжении 1-3 лет у всех пациентов.

Из анамнеза выяснено, что обострений заболевания не было. При осмотре у всех пациентов десна бледно$розового цвета, не кровоточила, пародонтальный карман не определялся, нет подвижности зубов. Однако при осмотре выявлено оголение шеек зубов у 17 (48,6%) пациентов за счет рецессии десенного края (у этих пациентов на визиограммах до операции определялась резорбция костной ткани до 1/3 длины корня). Рентгенологически у этих пациентов отмечено полное восстановление костной ткани. У 12 (34,3%) — оголение корня от 1 до 1,5 мм, соответственно у этих пациентов резорбция костной ткани была выраженной — до 1/2 длины корня. Рентгенологически восстановление костной ткани произошло до 1/3 первоначальной резорбции. У 6 (17,1%) — рецессия отмечена до 2$3 мм, соответственно резорбция альвеолярного отростка была до 2/3 длины корня. Рентгенологически восстановление костной ткани произошло до 1/3 длины, на верхушке сохранился остеопороз, а вершина гребня была ниже на 3 мм. Пародонтальные карманы не определялись у всех пациентов. Следовательно, можно с уверенностью констатировать, что восстановление костной ткани после трансплантации стволовых клеток произошло в пределах 30-35%.

Заключение

Таким образом, метод лечения генерализованного пародонтита, разработанный нами в Центральной научно-исследовательской лаборатории Украинской медицинской стоматологической академии под руководством проф. И.П. Кайдашева, является новым, эффективным и перспективным методом. После хирургического лечения через 10-12 месяцев репаративные регенеративные процессы улучшаются не только в мягких, но и в костных тканях пародонта, чего до настоящего времени не удавалось добиться отечественным исследователям. Сравнение результатов денситометрии до лечения и в отдаленные сроки после оперативного вмешательства показало уплотнение костной ткани в среднем на 11,63±1,63% (р<0,001), индивидуальное уплотнение костной ткани колебалось от 7,23% до 19,64%. Метод лечения легко выполним, доступен для врачей, экономичен для пациентов. Отмеченные нами незначительные последствия оперативного вмешательства — оголение шеек зубов у одних пациентов, а у других даже части корня, на наш взгляд, можно объяснить разной стадией заболевания, степенью резорбции костной ткани.

Однако до настоящего времени не полностью определены механизм действия стволовых клеток, необходимое количество вводимого клеточного материала, наиболее адекватный способ введения этих клеток, методы диагностики клинической эффективности клеточной терапии 9, поэтому нужны новые исследования, которые бы определили не только методику выращивания стволовых клеток, но и путь их введения, способ, необходимое количество для введения в рану.

Литература

  1. Белоклицкая Г.Ф., Центило Т.Д. Иммунокорригирующая подготовка больных пародонтитом к имплантации // Перший укр. міжнар. конгрес. —Київ. —2004. —С. 25-26.
  2. Георгиев Т.Д., Чумакова Ю.Г. Эффективность хирургического лечения генерализованного пародонтита у больных со сниженной минеральной плотностью костной ткани // Вестник стоматологии. —Одесса. —2005. —№ 1. —С. 41-45.
  3. Деньга О.В., Жук Д.Д. Эффективность сочетанного применения КВЧ-терапии и адаптогенных препаратов растительного происхождения при лечении хронического катарального гингивита у детей // Вісник стоматології. —2003. —№4. —С. 76-78.
  4. Иорданишвили А.К., Гололобов В.Г. Репаративный остеогенез: Теоретические и прикладные аспекты проблемы // Пародонтология. —2001. —№ 1-2 (19-20). —С. 22-31.
  5. Лобань Г.А., Федорченко В.І. Мікробіологія, вірусологія та імунологія порожнини рота. —Полтава: Верстка. —2004. —132 с.
  6. Мащенко І.С., Самойленко А.В., Соколова І.І. Зміни в системі загального імунітету у осіб з генетичною схильністю до пародонтиту // Вісник стоматології. —2002. —№ 3. —С. 8-9.
  7. Царев В.Н., Николаева Е.Н., Максимовский Ю.М. и др. Перспективы применения молекулярно-генетических методов исследования в диагностике пародонтита // Российский стоматологический журнал. —2002. —№ 5. —С. 6-9.
  8. Цыб А.Ф., Коноплянников А.Г., Колесникова А.И., Павлов В.В. Получение и использование в медицине клеточных культур из мезенхимальных стволовых клеток костного мозга человека // Вестник РАМН. —2004. —№ 9. —С. 71-76.
  9. Радченко М.Р. Вплив періневральної трансплантації ембріональної нервової тканини на динаміку змін здорових потенціалів, зумовлених метаноловою інтоксикацією у кроликів // Трансплантологія. —2003. —Т. 4, № 1. —С. 99-101.
  10. Эпидемиология, этиология и профилактика болезней пародонта // Доклад научной группы ВОЗ. —ВОЗ, Женева. —1980. —66 с.
  11. Y. Yamada, M. Ueda, H. Hibi, S.Baba. A novel approach to periodontal tissue regeneration with mesenchymal stem cells and platelet-rich plasma using tissue engineering technology: A clinical case report // Int J Periodontics Restorative Dent. —2006. —Vol. 26. —N.4. —P.363-369.
  12. Benayahu D., Akavia U.D., Shur I. Differentiation of bone marrow stroma-derived mesenchymal cells // Curr Med Chem. —2007. —Vol. 4. —N.2. —P.173-179.
  13. O.Mana, R.Khosravi, E.Mezey, S.Tran. Cells from bone marrow that evolve into oral tissues and their clinical applications // Oral Dis. —2007. —Vol. 13. —N13. —P.11-16.
  14. J.J.Mao, W.V.Giannobile, J.A.Helms et al. Craniofacial tissue engineering by stem cells // J Dent Res. —2006. —Vol. 85. —N.11. —P.966-979.
  15. A.Viswanathan, R.G.Painter, N.A.Lanson, G.Wang. Functional Expression of N-formyl Peptide Receptors in Human Bone Marrow-derived Mesenchymal Stem Cells // Stem Cells. —2007. —Vol. 18.
  16. Q.Zeng, X.Li, G.Beck et al. Growth and differentiation factor-5 (GDE-5) stimulates osteogenic differentiation and increases vascular endothelial growth factor (VEGF) levels in fat-derived stromal cells in vitro // Bone. —2007. —Vol. 40. —N.2. —P.374-381.
  17. A.J. van Winkelhoff, B.G.Loos, W.A. van der Reijden, U. van der Velden. Porphyromonas gingivalis, Bacteroides forsythus and other putative periodontal pathogens in subjects with and without periodontal destruction // J.Clin.Penodontol. —2002. —Vol. 29. —N.11. —P.1023-1028.
  18. M.Sakamoto. Y.Takeuchi. M.Umeda et al. Rapid detection and quantification of five periodontopathic bacteria by real-time PCR // Microbiol.Imimunol. —2001. —Vol. 45. —N.1. —P.39-44.
  19. Reddi A.H., Cunningham N.S. Bone induction by osteogenin and bone morphogenetic proteins // Biomaterials. —1990. —Vol. 11. —P.33-34.
  20. K.Kawate, H.Yajima, H.Ohgushi et al. Tissue-engineered approach for the treatment of steroid-induced osteonecrosis of the femoral head: transplantation of autologous mesenchymal stem cells cultured with beta-tricalcium phosphate ceramics and free vascularized fibula // ArtifOrgans. —2006. —Vol.30. —N.12. —P.960-962.
  21. П. Скрипников, Н. Ярынич-Бучинская, И. Кайдашев, Л. Богашова, Н. Боброва. Хирургическое лечение хронического генерализованного пародонтита аутологичными мезенхимальными стволовыми клетками крови. // Світ медицини та біології. —2006. —№4. —С. 76-79.
  22. Пат. 55698А Україна, А61С17/00. Спосіб хірургічного лікування пародонтиту: Деклараційний патент України на винахід 55698А Україна, А61С17/00. Бучинська Н., Богашова. Л. Опубл. 15.04.2003. Бюл. №4.
  23. Пат. 16622 Україна, А61N2/00. Спосіб стимуляції репаративної регенерації кісткових тканин: Деклараційний патент України на корисну модель 16622 Україна, А61N2/00. ЯринічБучинська Н., Скрипніков П., Богашова Л., Боброва Н., Кайдашев І. Опубл. 15.08.2006. Бюл. №8.
  24. Пат. 19148 Україна, А61N2/00. Спосіб хірургічного лікування пародонтиту з застосуванням аутологічних мезенхімальних стовбурових клітин крові: Деклараційний патент України на корисну модель 19148 Україна, А61N2/00. Яриніч-Бучинська Н., Скрипніков П., Богашова Л., Боброва Н., Кайдашев І. Опубл. 15.12.2006. Бюл. №12.
  25. И. Кайдашев, П. Скрипников, Л. Богашова, Н. Ярынич-Бучинская, Н. Куценко. Биоинженерные аутотрансплантаты для регенерации тканей пародонта и их иммунофенотипическая характеристика. // Інноваційні технології — в стоматологічну практику: Матеріали ІІІ з'їзду Асоціації стоматологів України. —2008. —С. 175-176.
  26. Яриніч-Бучинська Н., Скрипніков П., Богашова Л., Боброва Н., Кайдашев І. Хірургічне лікування хронічного генералізованого пародонтиту аутологічними мезенхімальними стовбуровими клітинами. Методичні рекомендації. Полтава. —2008. —24 с.
  27. Степанов А. Хирургические вмешательства при заболеваниях пародонта. Москва. —1991. —138с.
Наверх